人的眼睛可以區(qū)分光的波長(zhǎng)（顏色）和振幅（亮度），但是對(duì)于無色透明的物體來說當(dāng)光線通過時(shí)光的波長(zhǎng)和振幅變化并不是那么明顯，因此在明場(chǎng)正常觀察下很難看到被檢測(cè)物。

相差顯微鏡就是利用倍檢測(cè)物體的光程之差進(jìn)行顯微鏡檢，其實(shí)也就是利用了光的干涉現(xiàn)象，將肉眼無法分辨的相位差變?yōu)榭梢苑直娴恼穹?，從而達(dá)到可以清晰觀察到無色透明的物質(zhì)。

相差顯微鏡提高了倍觀測(cè)物體個(gè)結(jié)構(gòu)間的對(duì)比度，使得結(jié)構(gòu)清晰可見。光線通過標(biāo)本后發(fā)生折射，偏離了源來的光路，同時(shí)被延遲了1/4λ（波長(zhǎng)），如果在增加或減少1/4λ，則光程差變?yōu)?/2λ，兩束光和軸厚干涉加強(qiáng)，振幅增大或減小，提高反差。